淀粉總脂肪測(cè)定方法
本標(biāo)準(zhǔn)參照采用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)ISO3947-1977《淀粉總脂肪測(cè)定方法》。
1.主題內(nèi)容與適用范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了溶劑抽提測(cè)定原淀粉、變性淀粉脂肪總含量的方法。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于脂肪總含量低于1.5%(m/m)的淀粉樣品。
2.術(shù)語
淀粉脂肪總含量:淀粉樣品中脂肪的全部含量。以樣品剩余物重量對(duì)樣品原重量的重量百分比來表示。
3.原理
通過煮沸的鹽酸水解樣品后，冷卻凝聚不溶解的物質(zhì)。即包括全部脂肪，再過濾進(jìn)行分離、干燥，并通過溶劑抽提出全部脂肪。干燥后得到樣品的總脂肪剩余物重量。
4.試劑
在測(cè)定過程中，只可使用分析純的試劑和蒸餾水。
4.1溶劑:n-己烷或石油醚(沸點(diǎn)范圍為0～60℃)或四氯化碳(這些溶劑有毒，小心使用）。
4.2鹽酸:ρ20為1.18g/mL。
4.3碘:0.001mol/L溶液。
4.4甲基橙:2g/L水溶液。
5.儀器
5.1抽提器:如索氏抽提器。
5.2抽提燒瓶:能密封連接抽提器(5.1)的下端。
5.3圓盤過濾紙:孔徑lOμm。溶劑(4.1)中的可溶性物質(zhì)能自由通過。
5.4高效水冷式蛇型冷凝器:能密封連接抽提器(5.1)的上端。
5.5電加熱裝置:有溫度控制器。
5.6水浴:溫度在15～25℃。
5.7沸水浴。
5.8烘箱:溫度能控制在50±1℃。
5.9真空烘箱:溫度能控制在100±1℃。
5.10燒杯:容量為60OmL。
5.11干燥器:內(nèi)有有效充足的干燥劑和一個(gè)多孔金屬厚板。
5.12分析天平。
6.分析步驟
6.1樣品的準(zhǔn)備
樣品應(yīng)進(jìn)行充分的混合。
6.2樣品量
根據(jù)脂肪總含量的估計(jì)值，稱取樣品25-50g,精確至0.1g，倒入燒杯(5.10)并加入100mL水。
6.3水解
用2OOmL水混合lOOmL鹽酸(4.2），并把該溶液煮沸，然后加到樣品液（6.2)中。
加熱此混合液至沸騰并維持5min。
將此混合液滴幾滴入試管，使之冷卻至室溫，再加入一滴碘液(4.3)，若無顏色出現(xiàn)，說明無淀粉存在，可按6.4所述進(jìn)行。
若出現(xiàn)藍(lán)色，須繼續(xù)煮沸混合液，并用上述方法不斷進(jìn)行檢查，直至確定混合液中不含淀粉為止。再按6.4所述進(jìn)行。
6.4分離凝聚物
將燒杯和內(nèi)盛混合液置于水浴（5.6)中3Omin，不時(shí)地?cái)嚢瑁�以確保溫度均勻，使脂肪析出。
用濾紙（5.3)過濾冷卻后的混合液，再用幾片干濾紙片將粘附于燒杯內(nèi)壁脂肪取出，一起加到濾紙中，并將沖洗燒杯的水也倒入濾紙中進(jìn)行過濾，確保定量。在室溫下用水沖洗被分離出的凝聚物和那幾片濾紙。直至濾液對(duì)甲基橙指示劑(4.4）呈中性。
折疊含有凝聚物的濾紙和那幾片濾紙，放在表面皿上在50±l℃的烘箱內(nèi)烘3h。
6.5脂肪的抽提
將已烘干的內(nèi)含凝聚物的濾紙用新的一張濾紙包密閉，然后放入抽提器（5.1)中。
將約5OmL溶劑(4.1)倒入預(yù)先烘干并稱重精確至0.001g的抽提燒瓶(5.2)內(nèi)，燒瓶與抽提器密封相連。再將冷凝器（5.4)密封相連于抽提器上端，打開開關(guān)，使冷凝水進(jìn)入冷凝器。
確保抽提器與其他各部緊密相連，以防止在抽提過程中溶劑的損失。
控制好溫度，使每分鐘能產(chǎn)升被冷凝溶劑150～200滴，或每小時(shí)虹吸循環(huán)7～10次，連續(xù)抽提3h。
拆下裝有被抽提出的脂肪的燒瓶，將其浸入沸水浴（5.7)中，蒸出燒瓶?jī)?nèi)幾乎全部的溶劑，然后將燒瓶放入真空烘箱（5.9)內(nèi)lh，溫度控制在100±1℃。再把燒瓶放入干燥器(5.11)內(nèi)，使之冷卻至室溫，稱重，精確至0.001g。
延長(zhǎng)干燥抽提物的時(shí)間，會(huì)導(dǎo)致由于脂肪的氧化而得到偏高的結(jié)果。
6.6測(cè)定次數(shù)
對(duì)同一樣品噸（6.1)進(jìn)行二次測(cè)定。
7.結(jié)果的表示
7.1計(jì)算方法
脂肪總含量以樣品剩余物重量對(duì)樣品原重量的重量百分比表示，X=[(m1-m2)/m0]×100
式中
X-樣品總脂肪含量，%；
m0-樣品的原重量，g；
m1-空抽提燒瓶的重量，g；
m2-抽提并干燥后抽提燒瓶和脂肪的總重量，g；
如允許差符合要求，取二次測(cè)定的算術(shù)平均值為結(jié)果。
結(jié)果保留二位小數(shù)。
7.2允許差
分析人員同時(shí)或迅速連續(xù)進(jìn)行二次測(cè)定，其結(jié)果之差的絕對(duì)值。該值應(yīng)不超過平均結(jié)果的5%。